Amidáza (AMD)
Enzýmy:Sú makromolekulárne biologické katalyzátory, väčšina enzýmov sú proteíny
Amidáza:Katalyzujte hydrolýzu rôznych endogénnych a cudzích alifatických a aromatických amidov prenesením acylovej skupiny do vody za vzniku voľných kyselín a amoniaku.Hydroxámové kyseliny a iné organické kyseliny sú široko používané ako liečivá, pretože sú zložkami rastových faktorov, antibiotík a inhibítorov nádorov.Amidázy možno rozdeliť na acylázy typu R a typu S podľa stereoselektivity katalyzátora.
Okrem toho, že amidáza katalyzuje hydrolýzu amidov, môže tiež katalyzovať reakcie prenosu acylu v prítomnosti ko-substrátov, ako je hydroxylamín.
Amidázy s rôznymi zdrojmi majú rôznu substrátovú špecifickosť, niektoré z nich môžu hydrolyzovať iba aromatické amidy, niektoré môžu hydrolyzovať iba alifatické amidy a niektoré hydrolyzovať α- alebo ω-aminoamidy.Väčšina amínov má dobrú katalytickú aktivitu len pre acyklické alebo jednoduché aromatické amidy, ale pre komplexné aromáty majú heterocyklické amidy, najmä amidy s orto substituentmi, vo všeobecnosti nízku aktivitu (len niekoľko enzýmov vykazuje lepšie katalytické účinky).
Katalytický mechanizmus:
| Enzýmy | Kód produktu | Kód produktu |
| Enzýmový prášok | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | sada 19 amidáz, po 50 mg 19 kusov * 50 mg / kus alebo iné množstvo |
| Súprava na skríning (SynKit) | ES-AMD-1900 | sada 19 amidáz, 1 mg každá 19 položiek * 1 mg / položka |
★ Vysoká substrátová špecifickosť.
★ Silná chirálna selektivita.
★ Vysoká účinnosť konverzie.
★ Menej vedľajších produktov.
★ Mierne reakčné podmienky.
★ Šetrné k životnému prostrediu.
➢ Enzýmový skríning by sa mal vykonávať pre špecifické substráty kvôli substrátovej špecifickosti a získať enzým, ktorý katalyzuje cieľový substrát s najlepším katalytickým účinkom.
➢ Nikdy neprichádzajte do kontaktu s extrémnymi podmienkami, ako sú: vysoká teplota, vysoké/nízke pH a organické rozpúšťadlo s vysokou koncentráciou.
➢ Normálne by mal reakčný systém obsahovať substrát, tlmivý roztok (optimálne reakčné pH enzýmu).V reakčnom systéme prenosu acylu by mali byť prítomné ko-substráty, ako je hydroxylamín.
➢ AMD by sa malo pridávať do reakčného systému ako posledné s optimálnym reakčným pH a teplotou.
➢ Všetky druhy AMD majú rôzne optimálne reakčné podmienky, takže každý z nich by sa mal ďalej študovať individuálne.
Príklad 1(1):
Hydrolytická aktivita na rôzne amidové substráty
| Substrát | Špecifická činnosť μmol min-1mg-1 | Substrát | Špecifická činnosť μmol min-1mg-1 |
| Acetamid | 3.8 | ο-OH benzamid | 1.4 |
| propiónamid | 3.9 | p-OH benzamid | 1.2 |
| laktamid | 12.8 | ο-NH2benzamid | 1,0 |
| Butyramid | 11.9 | p-NH2benzamid | 0,8 |
| izobutyramid | 26.2 | ο-Toluamid | 0,3 |
| pentánamid | 22.0 | p-Toluamid | 8.1 |
| Hexánamid | 6.4 | nikotínamid | 1.7 |
| cyklohexánamid | 19.5 | izonikotínamid | 1.8 |
| akrylamid | 10.2 | pikolínamid | 2.1 |
| metakrylamid | 3.5 | 3-fenylpropiónamid | 7.6 |
| prolínamid | 3.4 | Indol-3-acetamid | 1.9 |
| benzamid | 6.8 |
Reakcia sa uskutočnila v 50 mM tlmivom roztoku fosforečnanu sodného, pH 7,5, pri 70 °C.
| Amidy | Hydroxylamín | Hydrazín |
| Acetamid | 8.4 | 1.4 |
| propiónamid | 18.4 | 3.0 |
| izobutyramid | 25.0 | 22.7 |
| benzamid | 9.2 | 6.1 |
Reakcia sa uskutočnila v 50 mM tlmivom roztoku fosforečnanu sodného, pH 7,5, pri 70 °C.
Koncentrácia súvisiaceho činidla: amidy, 100 mM (benzamid, 10 mM);hydroxylamín a hydrazín, 400 mM;enzým 0,9 μM.
Príklad 2(2):
Príklad 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., a kol.Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR a kol.Process Biochemistry, 2015, 50 (8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM a kol.Bioorganická chémia, 2017, Dostupné online 7.
